形态学实验技术

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1、脑尼氏体脑尼氏体 星形细胞星形细胞肾淀粉样变肾淀粉样变 刚果红染色刚果红染色肝表面抗原维多利亚蓝肝表面抗原维多利亚蓝“抗抗体抗抗体”（二抗（二抗酶底物显色剂酶底物显色剂DABBCIP-NBTAECNew Fuchsin卡巴唑SP法操作流程1、脱蜡至水脱蜡至水2 2、修复抗原修复抗原3 3、0.3%0.3%过氧化氢过氧化氢 室温室温 10 min10 min4 4、非免疫血清非免疫血清 室温室温 5 530min30min5 5、特异性免疫抗体特异性免疫抗体( (一抗一抗) 3760 ) 3760 min min 或或44过夜过夜6、BiotinIgG（二抗）（二抗） 37 3040min7、S

2、traptavidinHRP 374050min8、DAB显色显色各步间均以各步间均以PBSPBS液充分洗涤液充分洗涤抗原未修复抗原未修复非特异性着色非特异性着色非特异性着色非特异性着色复染复染对照对照自身对照自身对照自身对照：自身对照： 在同一切片上，与检测的目的物对照在同一切片上，与检测的目的物对照比较。如比较。如ActinActin、CD34CD34在正常组织中的血管在正常组织中的血管壁肌层应为阳性，壁肌层应为阳性，VimentinVimentin可选间质细胞。可选间质细胞。如果应为阳性的组织是阳性，则技术操作如果应为阳性的组织是阳性，则技术操作正确，如为阴性，则表明技术或免疫试剂正确，如为阴性，则表明技术或免疫试剂质量有问题。质量有问题。2.2.空白对照：用缓冲液替代一抗。空白对照：用缓冲液替代一抗。3.3.替代对照：用非免疫血清替代一抗。替代对照：用非免疫血清替代一抗。Rb2/P130