灭菌效果检测



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1、一.高温对培养基的影响?影响n形成沉淀物(如有机多肽类和无机物碳酸盐、磷酸盐沉淀等)n破坏营养,提高色泽(如:氨基糖、焦糖褐变)n改变培养基 PH(可使PH下降)n降低培养基浓度n发生美拉德反应而降低营养美拉德反应 美拉德反应是胺、氨基酸、蛋白质与糖类、醛类、酮类之间的反应。糖、醛、酮类自身也有可能发生褐变,当其与氨基酸、蛋白质共存时,更有促进褐变的作用。2.预防措施n特殊加热灭菌法(如:微波炉灭菌、连消法灭菌等)n过滤除菌法(如:膜过滤、石棉板过滤、硅藻土过滤等)n迅速降温(目的:有效降低营养成分的流失。一般降低温度:60min内降到60以下或更低)n其他方法:按配方逐一加入二.如何检查灭菌
2、效果?1培养基灭菌效果检查2接种室灭菌效果检查培养基灭菌效果检查1n试管母种培养基灭菌从高压蒸汽灭菌锅不同位置随机抽取5支放置恒温培养箱(26-30 5-7 d)培养 若无杂菌出现,则灭菌彻底。培养基灭菌效果检查2n种子和发酵液体培养基灭菌从灭菌锅各层分别取样(每层对角线随机取样5瓶 ,恒温培养箱 28-30 5-7d ) ) 检查有无霉菌菌落 ( 进行细菌检查)将抽取的样品无菌取出少量接入细菌培养基) 37 条件培养24h 若无细菌菌落,则灭菌彻底接种室灭菌效果检查n(1)平皿法n(2)试管法1)平皿法n制作常规的霉菌培养基(如:牛血清白蛋白)灭菌常规制作平板随机取几组无菌平皿培养基(每组3-5个平皿) 在接种室台面不同位置打开平皿,其中一组不打开作为对照开盖平皿放置5min然后盖盖与对照组同时在30 培养72h 检查是否有霉菌菌落,若实验组少于1个菌落则合格n细菌检查与此相同2)试管法n取制作好的真菌与细菌常规培养基斜面各3-5支为一组放置接种室内按无菌操作打开实验组棉塞30min 塞好无菌棉塞与对照组同时放在30 和37 培养细菌培养24-28h,霉菌72h观察若实验组均不长任何菌落,则接种室灭菌良好