基因工程问答题整理

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1、名解抗体：B细胞在抗原的刺激下分化为浆细胞，产生具有与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白，称为抗体。Fab：用木瓜蛋白酶将IgG分子断裂的3个大小相似的片段中能与抗原结合的2个片段Fc：用木瓜蛋白酶将IgG分子断裂的3个大小相似的片段中不能与抗原结合的1个片段免疫球蛋白：具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白。超变区：重链和轻链的V区各有三个区域的氨基酸组成和排列顺序特别易变化，称为超变区可变区：重链和轻链靠近N端的约110个氨基酸的序列变化很大，称为可变区单克隆抗体：由一个克隆细胞产生、只作用于某一抗原决定基的均一抗体。借助小鼠B细胞杂交瘤技术，所制备的高度均一（属同一

2、类、亚类、型别）、单一特异性（仅针对特定抗定抗原表位）的抗体ADCC：抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用，表达Fc受体的细胞通过识别抗体的Fc段直接杀伤呗抗体包被的靶细胞。调理作用：抗体，补体等调理素促进吞噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原的作用J链：一条由浆细胞合成的富含半胱氨酸的多肽链，可连接Ig单体形成的二聚体，五聚体或多聚体分泌片：分泌型IgA的一个辅助成分，由粘膜上皮合成，连接IgA二聚体上，使其成为分泌型，保护其铰链区免受蛋白水解酶作用，介导其转运到粘膜表面Ig功能区：Ig分子的每条肽链可折叠为几个功能不同，结构相似的球形功能区，或称结构域Ig折叠：由几股多肽链折叠形成的2个反向平行的片层结

3、构，2个片层结构中心的2个半胱氨酸残基由一个链内2硫键垂直连接，可稳定结构域，形成一个桶状结构，这种折叠方式称为免疫球蛋白折叠。CDR：互补性决定区，即高变区（超变区）Ig：免疫球蛋白同种型：同一种属内所有个体共有的Ig抗原特异性标记同种异型：同一种属不同个体间Ig分子所具有的不同抗原特异性标志。由若干散在分布的氨基酸序列差异导致。独特型：每一个Ig分子在CDR区氨基酸序列所显示出的免疫性，是每一个Ig分子所特有的抗原特异性标志。多克隆抗体：用含多种抗原决定簇的抗原物质免疫动物，刺激多个B细胞克隆所获得的免疫血清（含多种抗体的混合物），此为多克隆抗体单克隆抗体：同7基因工程抗体：根据研究者的意

4、图，采用基因工程方法，在基因水平，对免疫球蛋白基因进行切割、拼接或修饰后导入受体细胞进行表达，产生新型抗体。主要包括 嵌合抗体、单链抗体、人源化抗体、双价抗体和双特异性抗体。嵌合抗体： 人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒定区融合而得到的抗体。改型抗体： CDR移植即把鼠抗体的CDR序列移植到人抗体的可变区内，所得到的抗体称CDR移植抗体或改型抗体，也就是人源化抗体。表面重置：对鼠CDR及FR表面残基进行镶饰或重塑，使之类似于人抗体CDR的轮廓或人FR的形式补偿交换：在人FR中选择与CDR有相互作用，与抗体的亲和力有密切关系或对FR空间结构折叠起关键作用的残基进行改变，以补偿完全的C

5、DR移植镶面抗体：以抗体为参照改造替换鼠源单抗的表面氨基酸残基得到的抗体单链抗体：用一编码亲水易折叠多肽的人工合成寡核苷酸，将重链V区（3）与轻链V区（5）端连接在一起即成单链抗体基因，将此基因克隆入原核或真核表达载体中，在原核或真核系统中表达出的蛋白质即为单链抗体 双特异型抗体：能同时识别2种抗原的抗体。1种为对应肿瘤相关抗原。另1种为对应效应成分。即能结合靶肿瘤细胞又能结合高细胞毒性的效应细胞,小分子抗体：包括Fab、Fv或ScFv、单域抗体及最小识别单位等几种分子量较小的抗体片段。单链抗体：见27最小识别单位：约为完整分子的1/80-1/70大小，一般由一个CDR构成，它也保持着抗体的特

6、异性，是比单域抗体更小的分子，仍能与抗原结合，只是亲和力相当低噬斑印迹：将菌落或噬菌斑直接转移到滤膜上，使溶菌抗体暴露，同标记抗原杂交进行杂交检测，杂后根据杂交信号及其相对应的菌落或噬菌斑的位置，杂交便可从大量菌落或噬菌斑中筛选出含有目的基因的噬菌斑。质粒展示技术：是以“蛋白-DNA复合物”形成为基础，将随机多肽与DNA结合蛋白以融合蛋白的形式表达，通过筛选可以得到目的蛋白及其编码基因序列，融合蛋白在相对还原的E.coli菌的细胞质内表达和折叠，体内融合蛋白结合于编码质粒的DNA序列上，从而实现目的蛋白“表型-基因型”的结合。疫苗：是一类接种后能激发人体 免疫反应来抵抗某些传染病的生物制品灭活

7、疫苗：灭活疫苗又称死疫苗，是指利用加热或甲醛等理化方法将人工大量培养的完整的病原微生物杀死，使其丧失感染性和毒性而保持其免疫原性，并结合相应的佐剂而制成的疫苗。弱毒疫苗：减毒活疫苗又称弱毒疫苗，是指将微生物的自然强毒株通过物理、化学和生物学的方法，连续传代，使其对原宿主丧失致病力，或只引起亚临床感染，但仍保持良好的免疫原性、遗传特性，用这种毒株制备的疫苗就叫减毒活疫苗。合成多肽疫苗：合成肽疫苗是指使用化学方法合成能够诱发机体产生免疫保护的多肽制成的疫苗。亚单位疫苗：亚单位疫苗是指提取或合成细菌、病毒外壳的特殊蛋白结构，即抗原决定簇制成的疫苗，这类疫苗不是完整的病毒，是病毒的一部分物质，故称亚单

8、位疫苗。基因缺失疫苗：使用分子生物学技术去除与毒力有关的基因获得的缺失突变毒株制成的疫苗重组活载体疫苗：基因工程载体疫苗是指利用微生物做载体，将保护性抗原基因重组到微生物体中，使用能表达保护性抗原基因的重组微生物制成的疫苗。核酸疫苗：指使用能够表达抗原的基因本身，即核酸制成的疫苗。定向突变：采用随机的基因突变或基因重组技术与定向的突变体筛选方法相结合得到分子进化技术，包括制备突变体文库，突变体文库在适当的表达系统内表达，筛选突变体盒式诱变：将靶基因的一段DNA删掉，并用人工化学合成所具有的突变核苷酸的双链寡核苷酸片段取代一、名词解释 1.基因：基因-有遗传效应的DNA片段，是控制生物性状的基本

9、遗传单位2.基因工程：是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品3.操纵子4.何谓接头连接法？5.质粒：能自主复制的染色体外DNA分子，为双链环状，广泛存在于细菌及某些蓝藻、绿藻和真菌细胞中。6.限制性核酸内切酶：可以识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶，简称限制酶7.PCR ：聚合酶链式反应8.RT-PCR9.cDNA文库以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）

10、连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。10.报告基因：载体分子上有一种特殊意义的基因序列，它们表达的目的是为了证明载体已经进入宿主细胞，并将含有外源基因的宿主细胞从其他细胞中区分并挑选出来。这种基因就是报告基因。11.载体:具备自我复制能力的DNA分子。12.克隆载体：可携带插入的外源DNA片段并可转入受体细胞中大量扩增的DNA分子。该分子中含有能够在受体细胞中自主复制的序列和筛选标记，常用于外源基因的克隆，如噬菌体或质粒。13.表达载体： 在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件（如启动子、RB

11、S、终止子等），使目的基因能够表达的载体。14.转化：某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。15.转染：真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。16.质粒载体在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒DNA序列中插入外源的目的基因，以质粒为载体，将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞，进行重组、筛选、扩增的过程。18.粘性末端：当一种限制性内切酶在一个特异性的碱基序列处切断DNA时，就可在切口处留下几个未配对的核苷酸片段，即5突出。这些片断可以通过重叠的5末端形成的氢键相连，或者通过分子内反应环化。因此称这些片段具有粘性，叫做