检验诊断试剂(免疫)

《检验诊断试剂(免疫)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《检验诊断试剂(免疫)（55页珍藏版）》请在文档大全上搜索。

1、酶免疫测定（EIA） 分类是否对结合的酶标志物进行分离是否对结合的酶标志物进行分离酶标志物、抗原、抗体、酶免疫复合物酶标志物、抗原、抗体、酶免疫复合物是否使用固相支持物是否使用固相支持物异相酶免疫测定均相酶免疫测定酶免疫测定固相相酶免疫测定液相酶免疫测定酶标志物、抗原、抗体、酶免疫复合物酶标志物、抗原、抗体、酶免疫复合物固相酶免疫测定 ELISA(酶联免疫吸附试验)酶标志物、抗原、抗体、酶免疫复合物酶标志物、抗原、抗体、酶免疫复合物酶标志物酶标记抗体或抗原 酶免疫技术的核心组成部分酶免疫技术的核心组成部分 酶结合物酶结合物（conjugateconjugate）酶标记物酶标记物 通过化学反应或

2、免通过化学反应或免疫学反应，让酶与疫学反应，让酶与抗体或抗原形成的抗体或抗原形成的结合物结合物 酶标记抗体或抗原 制备方法制备方法过碘酸钠法（直接法）过碘酸钠法（直接法）常用于常用于HRPHRP标记抗体或抗原标记抗体或抗原 戊二醛交戊二醛交联法联法1.1.辣根过氧化物酶（辣根过氧化物酶（HRPHRP） 糖蛋白（主酶）糖蛋白（主酶）亚铁血红素（辅基）亚铁血红素（辅基）主酶与酶活性无关主酶与酶活性无关 辅基是酶的活性中心辅基是酶的活性中心( (ELISA中应用最为广泛的标记中应用最为广泛的标记用酶用酶 )ELISAELISA常用酶常用酶2.2.碱性磷酸酶（碱性磷酸酶（APAP） 辣根过氧化物酶辣根

3、过氧化物酶HRP上的糖羟基可以被高碘上的糖羟基可以被高碘酸钠（酸钠（NaPIO4）激活生成醛基，这些醛基）激活生成醛基，这些醛基能通过能通过Schiff碱与蛋白中的氨基偶联，紧接碱与蛋白中的氨基偶联，紧接着还原着还原Schiff碱形成稳定的偶联产物。碱形成稳定的偶联产物。这种这种HRP偶联标记方法已经被广泛认可，但是也偶联标记方法已经被广泛认可，但是也存在一定的缺陷，特别是去除过量高碘酸钠存在一定的缺陷，特别是去除过量高碘酸钠（NaPIO4）的过程较为繁琐。需要注意的）的过程较为繁琐。需要注意的是，被高碘酸钠（是，被高碘酸钠（NaPIO4）激活的）激活的HRP很很不稳定，其酶活力会在几天内丢失

4、不稳定，其酶活力会在几天内丢失 评价均相酶免疫测定 homogenous enzyme immunoassay 用于小分子激素和半抗原（如药物）的测定用于小分子激素和半抗原（如药物）的测定 酶标记物与相应的抗原或抗体结合后，酶标记物与相应的抗原或抗体结合后，标记酶的活性会发生改变，不用分离结合标记酶的活性会发生改变，不用分离结合和游离酶标记物，通过测定标记酶的活性和游离酶标记物，通过测定标记酶的活性的改变，而确定抗原或抗体的含量。的改变，而确定抗原或抗体的含量。原理原理均相酶免疫测定 最具代表性的两种技术最具代表性的两种技术酶放大免疫测定技术酶放大免疫测定技术EMITEMITenzyme-mu