支原体、立克次体

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1、第第19章章 支原体支原体Mycoplasma微生物学教研室微生物学教研室王红艳王红艳概念：支原体是一类概念：支原体是一类缺乏细胞壁缺乏细胞壁的原核细的原核细胞型微生物，也是在胞型微生物，也是在无生命培养基上生长无生命培养基上生长繁殖的繁殖的最小最小微生物微生物。其特点为细胞膜含固。其特点为细胞膜含固醇，能通过细菌滤器；高度多形性、形成醇，能通过细菌滤器；高度多形性、形成分枝的长丝；含分枝的长丝；含DNADNA和和RNARNA，二分裂繁殖等。，二分裂繁殖等。柔膜体纲支原体目支原体科 无胆甾原体科 螺原体科支原体属 脲原体属主要病原性支原体主要病原性支原体n肺炎支原体肺炎支原体 M.pneumo

2、niaeM.pneumoniaen人型支原体人型支原体 M. NominisM. Nominisn生殖器支原体生殖器支原体 M.genitaliumM.genitaliumn穿透支原体穿透支原体 M . penetrausM . penetrausn溶脲脲原体溶脲脲原体 U.urealyticumU.urealyticum第一节第一节 概概 述述一、生物学性状一、生物学性状1. 1. 形态结构形态结构最小的原核细胞生物；最小的原核细胞生物；球形、球杆形、长丝球形、球杆形、长丝状及分枝状等状及分枝状等多多种形态；种形态；G-，着色困难，常，着色困难，常用用Giemsa染色法染染色法染成淡紫色。成

3、淡紫色。细胞膜由细胞膜由蛋白质和脂质蛋白质和脂质（固醇固醇）组成）组成三层结构三层结构 特殊的顶端结构： 粘附宿主上皮 细胞表面，与支原 体的致病有关。2. 2. 培养特性培养特性: :荷包蛋样菌落荷包蛋样菌落培养基中含人或动培养基中含人或动物的血清物的血清(1020%)及酵母浸液。及酵母浸液。多数支原体能在鸡多数支原体能在鸡胚绒毛尿囊膜或细胚绒毛尿囊膜或细胞培养中生长。胞培养中生长。固体培养基：固体培养基： 27天天长出直径约长出直径约10600m的的典型的典型的“荷包蛋样荷包蛋样”菌落菌落：低倍镜下低倍镜下见见菌落呈圆形，心致密隆起，深入琼脂，菌落呈圆形，心致密隆起，深入琼脂，外周由颗粒包

4、绕外周由颗粒包绕。液体培养基：液体培养基： 清亮清亮支原体是污染细胞培养的重要原因之一支原体是污染细胞培养的重要原因之一 鉴别点 支原体 细菌L型细胞壁缺失原因 在遗传上与细菌无关 与原菌相关，可以回复细胞膜 含高浓度固醇 细胞膜不含固醇 培养特性 需要胆固醇 大多需要高渗培养 菌落大小 生长慢，菌落小 菌落稍大 ( 0.61.0) 液体培养 液体培养混浊度极低 一定混浊度，可附壁支原体与细菌L型的异同点n 不同点n 相同点 支原体支原体 葡萄糖葡萄糖 精氨酸精氨酸 尿素尿素 吸附细胞吸附细胞 致病性致病性 肺炎支原体肺炎支原体 + 红细胞红细胞 肺炎、支气管炎肺炎、支气管炎人型支原体人型支原

5、体 + 泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染生殖器支原体生殖器支原体 + 泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染穿透支原体穿透支原体 + + 红细胞红细胞 条件感染条件感染 CD4+T细胞细胞 多见于艾滋病多见于艾滋病 巨噬细胞巨噬细胞 溶脲脲原体溶脲脲原体 + 泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染 流产及不孕不育流产及不孕不育 3、生化反应溶脲脲原体分解尿素产氨，是酚红变红，液体清亮，为阳性（右） （四）抗原结构抗原结构 来自细胞膜，胞膜外层蛋白质是主要抗原，来自细胞膜，胞膜外层蛋白质是主要抗原， 常用生长抑制试验常用生长抑制试验(GIT)与代谢抑制试验与代谢抑制试验 (MIT)鉴定。鉴定。 GIT是将吸有型特异性抗

6、血清的滤纸片置于接种有是将吸有型特异性抗血清的滤纸片置于接种有支原体的固体培养基上，支原体的固体培养基上， 经孵育出现同型血清抑制经孵育出现同型血清抑制该型支原体生长现象。该型支原体生长现象。 MIT是将支原体接种在含有抗血清培养基中，若抗是将支原体接种在含有抗血清培养基中，若抗体与支原体型一致，则抑制该支原体不能分解葡萄体与支原体型一致，则抑制该支原体不能分解葡萄糖产酸。此两种方法可将支原体分成若干血清型。糖产酸。此两种方法可将支原体分成若干血清型。二、致病性与免疫性顶端结构与宿主细胞上受体结合而粘附于细胞上顶端结构与宿主细胞上受体结合而粘附于细胞上荚膜或微荚膜的抗吞噬作用荚膜或微荚膜的抗吞

7、噬作用产生毒性代谢产物产生毒性代谢产物超抗原，刺激炎症细胞分泌大量细胞因子超抗原，刺激炎症细胞分泌大量细胞因子粘附、侵入粘附、侵入CD4 TCD4 T淋巴细胞（穿透支原体）淋巴细胞（穿透支原体）第二节第二节 主要致病性支原体主要致病性支原体一一 肺炎支原体肺炎支原体n是下呼吸道重要的致病性支原体，所引起的人类是下呼吸道重要的致病性支原体，所引起的人类支原体肺炎占细菌性肺炎支原体肺炎占细菌性肺炎50%左右，其病理变化以左右，其病理变化以间质性肺炎为主，又称之原发性非典型性肺炎。间质性肺炎为主，又称之原发性非典型性肺炎。症状轻，与胸片严重程度不符症状轻，与胸片严重程度不符（一）致病性 1.主要经飞

8、沫传播，主要经飞沫传播，但但大多数发生于夏大多数发生于夏 末秋初，末秋初，515岁青少年发病率最高岁青少年发病率最高。 2.含特殊的顶端结构含特殊的顶端结构：P1表面蛋白（表面蛋白（170 kDa）和和P30（32 kDa）为主要的为主要的粘附粘附蛋白，使肺炎蛋白，使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮支原体黏附于呼吸道上皮。 3.肺炎支原体具有超抗原作用，能刺激炎症细胞肺炎支原体具有超抗原作用，能刺激炎症细胞在感染部位释放大量的淋巴因子（如在感染部位释放大量的淋巴因子（如TNF-、IL-1、IL-6）引起组织损伤）引起组织损伤。致病性与免疫性致病性与免疫性所致疾病所致疾病-支原体肺炎支原体肺炎n传播途

9、径传播途径 n经飞沫传播经飞沫传播n发病年龄发病年龄 n儿童及青少年多见儿童及青少年多见n潜伏期潜伏期 2 23W3Wn临床表现临床表现n发热发热（约（约3939）、头痛、）、头痛、持续性顽固咳嗽持续性顽固咳嗽、胸痛等。一般经胸痛等。一般经3 310d10d主要症状消失，但主要症状消失，但咳嗽可以持续咳嗽可以持续1 1个月之久。个月之久。（一）分离培养 痰或咽拭子接种在SP-4培养基，挑选可疑菌落，经形态学、糖发酵、溶血性、血细胞吸附试验进行初步鉴定，进一步鉴定需用特异性抗血清做GIT与MIT实验。三三、微生物学检查法、微生物学检查法三三、微生物学检查法、微生物学检查法ELISA：此法敏感，特

10、异性高，快速、经此法敏感，特异性高，快速、经济，并可检测济，并可检测IgM和和IgG抗体，为目前诊抗体，为目前诊断的可靠方法。检测分子量断的可靠方法。检测分子量190kDa的的P1蛋白，蛋白，3h可完成试验，特异性高，敏感可完成试验，特异性高，敏感性为性为10 4CFUl标本。标本。防治原则 大环内酯类药物 喹诺酮类药物四四、防治原则、防治原则二二 解脲脲原体解脲脲原体溶脲脲原体溶脲脲原体 U.urealyticumU.urealyticum人型支原体人型支原体 M. NominisM. Nominis生殖器支原体生殖器支原体 M.genitaliumM.genitalium性传播疾病（性传播

11、疾病（STD）的病原体）的病原体解脲脲原体解脲脲原体 通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜，引起通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜，引起非淋非淋菌性尿道炎菌性尿道炎，也能引起盆腔等部位的感染。，也能引起盆腔等部位的感染。还可通过胎盘感染胎儿，出现早产和死胎。还可通过胎盘感染胎儿，出现早产和死胎。也能引起妇女也能引起妇女不孕不育症不孕不育症。常与衣原体、淋球菌合并感染常与衣原体、淋球菌合并感染1.寄居泌尿生殖道，寄居泌尿生殖道，2.传播途径为传播途径为性接触和母婴传播性接触和母婴传播。3.致病机制致病机制-粘附粘附于宿主细胞表面，引起细胞膜损伤；于宿主细胞表面，引起细胞膜损伤；-产生毒性代谢产物如产生毒性代谢