紫外光分光光度计

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1、一、紫外分光光度计工作原理二、紫外分光光度计构造三、 紫外分光光度计检测DNA 质量的原理 四、 紫外分光光度计操作 紫外分光光度计基本工作原理是用一定频率的紫外、可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。得出的一组随吸收波长改变而变化的光谱，可以反映试样的特征。在紫外光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度于试样中该成分的浓度成正比。因此可通过测定其吸收度来得出我们所需。 基本依据： 单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，即朗伯- 比尔定律，这是吸收光谱法定量的理论依据。即： A = ECL 式中 A 为吸

2、收度 ； E 为吸收系数，即单位浓度、单位液层厚度的吸收度数值； C 为溶液浓度； L 为液层厚度。 基本构造主要由光源、单色器、吸收池、检测器和显示器五大部分组成。光源光源 单色单色器器 样品样品池池 检测器检测器 显示器显示器 在整个紫外光区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 紫外区常为氢灯或氘灯，发射的连续波长范围是180-360 nm。 单色器是将光源辐射的复合光分成单色光的光学装置。它是分光光度计的心脏部分。单色器一般由狭缝、色散元件及透镜系统组成。关键是色散元件，最常见的色散元件是棱镜和光栅。狭缝：将单色器的散射光切割成单色光。直接关系到仪器的分辨

3、 率。狭缝越小，光的单色性越好。分为入射狭缝和出射狭缝。棱镜:玻璃3503200 nm，石英1854000 nm。光栅:波长范围宽，色散均匀，分辨性能好，使用方便。543211.入射狭缝 2.准直透镜 3.棱镜 4.聚焦棱镜 5.出射狭缝 用于盛装试液的装置（或叫比色皿）吸收材料必须能够透过所测光谱范围的光。一般可见光区使用玻璃吸收池，紫外光使用石英吸收池。 规格有0.5、1.0、2.0、5.0cm 等。 在高精度的分析测定中（紫外光区尤其重要）比色皿要挑选配对，因为其材料的本身吸光特性以及比色皿的光程长度的精度等对分析结果都有影响。4. 4. 检测器检测器 利用光电效应将透过吸收池的光信号变