细菌半数致死量测定张玉晴

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1、细菌细菌LD50测定方法测定方法报告人：张玉晴报告人：张玉晴指导老师：李槿年教授指导老师：李槿年教授大纲1LD50基本概念2LD50计算方法LD50具体操作步骤3注意事项4w半数致死量：LD50（Lethal dose）表示在规定时间内,通过指定感染途径,使一定体重或年龄的某种动物半数死亡所需最小细菌数或毒素量。 1LD50基本概念w1、寇氏法/改良寇氏法w2、累计法（Reed-Muench法）w3、霍恩氏法（Horn氏法）w4、加权法w5、序贯法w6、固定剂量法w7、logistic模型法LD50计算方法2w1、寇氏法/改良寇氏法 公式：LD50= lg -1Xm i (P 0.5) X50

2、=lgLD50 LD50 95%可信限=lg -1（X50 1.96SX50） LD50平均可信限=LD50 （LD50可信限高限-低限）/2 Xm：最大剂量的对数值i ：相邻两组剂量对数值之差P：各组动物死亡率，用小数表示P：各组动物死亡率之总和 n：每组动物数w预试验找出引起0%死亡率和100死亡率剂量的所在范围w反应量大致呈正态分布w剂量必须按等比级数分布w各组动物数相等w2、累计法（Reed-Muench法） 它是先将实验死亡动物数和存活动物数进行累计加和, 再用加和的数据计算死亡率。在死亡率中有2个数据A和B,且A刚好大于50%,B刚好小于50% w计算方便, 更多地运用在微生物学中

3、, 尤其在稀释分析中w不考虑操作误差, 计算结果不够精确, 粗略判断LD50。拟态弧菌对草鱼LD50的测定335%来苏尔浸泡24h自来水冲洗15432一、实验准备：二、细菌总数测定 挑取HX4单个菌落10mL生理盐水重悬100mLBHI液体培养基离心收集菌体洗涤菌体3次测量菌落大小30 150r/min振荡培养24h8000r/min离心8min平板菌落计数法计数4保存用于攻毒10-110-310-210-410-510-610-710-810-930倒置倒置培养培养24h记录平板上菌落数记录平板上菌落数量，肉眼观察量，肉眼观察+放放大镜检查大镜检查w数据处理 选取同一稀释度平均菌落数在303