菌种保藏及活化

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1、菌种保藏及活化菌种保藏及活化 菌种保藏的原理和方法菌种保藏的原理和方法一、菌种保藏的目的一、菌种保藏的目的 保存、不退化 二、菌种保藏的原理二、菌种保藏的原理 DNA复制时自发突变是造成菌种退化的原因，因此要创造代复制时自发突变是造成菌种退化的原因，因此要创造代谢不活泼的状态谢不活泼的状态 。 休眠态（孢子、芽孢）休眠态（孢子、芽孢）代谢不活泼的状态代谢不活泼的状态 环境（干燥、低温、缺氧、缺营养）环境（干燥、低温、缺氧、缺营养） 斜面保藏法和穿刺保藏法斜面保藏法和穿刺保藏法 沙土管干燥保藏法沙土管干燥保藏法 真空冷冻干燥保藏法真空冷冻干燥保藏法液氮保藏法液氮保藏法 悬液保藏法悬液保藏法 低温

2、保藏法低温保藏法 三、菌种保藏的方法三、菌种保藏的方法 一种良好的菌种保藏方法，首先应保持原菌一种良好的菌种保藏方法，首先应保持原菌优良性状长期优良性状长期稳定稳定，同时还应该考虑方法的，同时还应该考虑方法的通用性通用性、操作的简便性操作的简便性和和设备设备的普及性的普及性。具体的方法很多，现把多种方法按类排列后作一。具体的方法很多，现把多种方法按类排列后作一综合性表解，以便读后有一全面了解。综合性表解，以便读后有一全面了解。（1）斜面保藏法：）斜面保藏法：是一种短期、过渡的保藏法，用新鲜斜面是一种短期、过渡的保藏法，用新鲜斜面接种接种后，后，置最适条件下培养到菌体或孢子生长丰满后，放在置最适

3、条件下培养到菌体或孢子生长丰满后，放在4冰箱保存（过低，会结冰；太高，达不到保存目的）。保存期一冰箱保存（过低，会结冰；太高，达不到保存目的）。保存期一般为般为36月。月。注意点：注意点：（1）水分：用牛皮纸避免水分蒸发，或用橡皮塞）水分：用牛皮纸避免水分蒸发，或用橡皮塞（2）培养基：专门设计的培养基，营养相对不太丰富）培养基：专门设计的培养基，营养相对不太丰富（3）微生物状态：孢子或芽孢长好后，再保藏，不易退化）微生物状态：孢子或芽孢长好后，再保藏，不易退化（4）温度：）温度：4冰箱保存（过低，会结冰；太高，达不到保存目冰箱保存（过低，会结冰；太高，达不到保存目的）的） （2）穿刺保藏法：）

4、穿刺保藏法： （略）（略） 1、斜面保藏法和穿刺保藏法、斜面保藏法和穿刺保藏法 2.沙土管干燥保藏法（略）沙土管干燥保藏法（略） 3.真空冷冻干燥保藏法真空冷冻干燥保藏法 是目前常用的较理想的一种方法。其基本原理是在较低温度是目前常用的较理想的一种方法。其基本原理是在较低温度下，（下，（-18），快速地将细胞冻结，并且保持细胞完整，然后），快速地将细胞冻结，并且保持细胞完整，然后在真空中使水分升华。在这样的环境中，微生物的生长和代谢在真空中使水分升华。在这样的环境中，微生物的生长和代谢都暂时停止，不易发生变异。一般可保存都暂时停止，不易发生变异。一般可保存510年左右。年左右。 4.液氮保藏法